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Y2HGold Yeast Strain 酵母雙雜交用甘油菌的實驗手冊

文章來源 : 齊岳生物

作者:zhn

發布時間 : 2022-08-23 12:41:44

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產品名稱:Y2HGold Yeast Strain 酵母雙雜交用甘油菌的實驗手冊

產品描述:

名稱:Y2HGold Yeast Strain 酵母雙雜交用甘油菌其他名稱:Y2HGold酵母雙雜交用甘油菌規格:300μl運輸溫度:干冰運輸保存溫度:-20℃保存期:1年應用:酵母雙雜交用菌株產品描述:酵母雙雜交系統是用于體內研究蛋白相互作用的一種便利的工具,常用的如GAL4為基礎的雙雜交系統,使用酵母轉錄因子GAL4來檢測轉錄后的蛋白相互作用。工作原理為:一個酵母轉錄因子GAL4由兩個可以分開,功能上相互的結構域組成,N端有一個147個氨基酸組成的DNA結合域(DNA- BD),C端有一個由113個氨基酸組成的轉錄域(AD)。DB可以識別并結合上游序列(UAS),而AD能UAS下游基因進行轉錄,單獨的BD或AD不能基因轉錄。正常情況,BD和AD不會結合,將待檢測的分別與BD和AD融合,形成誘餌融合蛋白(bait-DNA)和誘捕融合蛋白(prey-DNA),只有當誘餌和誘捕蛋白發生相互作用,促使BD和AD的相互接近,形成GAL4,從而報告基因的轉錄。Y2HGold是GAL4系統酵母雙雜交用實驗菌株,能直接轉化質粒或與MATα型酵母菌株Y187通過接合(mating)操作進行蛋白相互作用驗證或雙雜交文庫篩選和構建。Y2HGold-GAL4酵母雙雜交系統需要兩種質粒配套使用,分別為pGBKT7和pGADT7。前者篩選標志為Trp,用于表達DNA-BD與誘餌蛋白(bait)的融合蛋白;后者篩選標志為Leu,用于表達AD與誘捕蛋白(prey)的融合蛋白。Y2HGold有四個報告基因:AUR1-C,HIS3, ADE2, MEL1,分別由三個完全異源的Gal4反應啟動元件-G1,G2,M1調控,這三種啟動子只有GAL4識別的17bp區相同,其余部分同。這一特征縮減假陽性發生的概率。因為,誘捕蛋白單獨結合引起假陽性都需要識別3個不同序列,4個報告基因表達。另外,新報告基因AUR1-C與以往的營養缺陷報告基因相比,其篩選-金擔子素(Aureobasidin A,AbA)可以殺死非抗性克隆,大大降低背景克隆的生長。具有更低背景,這一特點也可降低酵母雙雜交假陽性發生的概率。基本信息:培養基:YPDA培養條件:28℃,YPDA,有氧培養保存方式:30%甘油,-20℃保存轉化方式:PEG/LiAC;電激;基本應用:酵母雙雜交實驗保存與運輸方法保存:-20℃保存,一年。運輸:干冰運輸。使用說明:齊岳生物提供的各批次質粒菌株發貨前均經過嚴格的多重驗證,如存在質量問題,請在收到產品三個月內通知我司。收到甘油菌后,請及時在固體平板上劃線培養,挑取單菌落接種到液體培養基中,震蕩培養后使用并保存新的甘油菌。注意事項1.使用甘油菌時可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固體瓊脂平板即可;也可完全融解后使用,但隨著凍融次數的增加,菌株的活力會逐漸下降。2. 為了您的和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。供應產品目錄:?SD/-Ade with AgarSD/-Ade/-His with AgarSD/-Ade/-His/-Leu/-Met/-Trp with AgarSD/-Ade/-His/-Leu/-Met-Trp/-Ura with AgarSD/-Ade/-His/-Leu/-Trp with AgarSD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/-Ura with AgarSD/-Ade/-His/-Met with AgarSD/-Ade/-His/-Trp with AgarSD/-Ade/-Leu with AgarSD/-Ade/-Leu/-His with AgarSD/-Ade/-Leu/-Trp with AgarSD/-Ade/-Trp with AgarSD/-Arg/-His/-Leu/-Lys/-Ura with AgarSD/-Cys/-Met/-Ura with AgarSD/-Glu/-Ura with AgarSD/-His with AgarSD/-His/-Leu with AgarSD/-His/-Leu/-Met/-Trp with AgarSD/-His/-Leu/-Met/-Ura with AgarSD/-His/-Leu/-Trp with AgarSD/-His/-Leu/-Trp/-Ura with AgarSD/-His/-Leu/-Ura with AgarSD/-His/-Trp with AgarSD/-His/-Trp/-Ura with AgarSD/-His/-Ura with AgarSD/-Leu with AgarSD/-Leu/-Ile/-Val with AgarSD/-Leu/-Met/-Trp with AgarSD/-Leu/-Met/-Trp/-Ura with AgarSD/-Leu/-Trp with AgarSD/-Leu/-Trp/-Ura with AgarSD/-Leu/-Ura with AgarSD/-Met with AgarSD/-Met/-Trp with AgarSD/-Trp with AgarSD/-Trp/-Ura with AgarSD/-Ura with Agaryyp2021.2.3 相關目錄: 明膠甲基丙烯酰基(GelMA)生物墨水自 DO Supplement -Trp配制、種類及用途

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